Як проводиться аналіз на бореліоз?

Полімеразна реакція ланцюга

Цей аналіз є сучасним способом виявлення різного роду захворювань, в тому числі і бореліозу. Останнім часом все частіше віддається перевага саме йому. Серед переваг можна відзначити наступне:

• технологічність забору матеріалу;
• висока надійність результатів;
• чутливість діагностики вище, ніж у інших застосовуваних методик;
• може не тільки виявити інфекційного збудника, але і визначити його кількість.

Імуноферментні дослідження

розшифровка результатів

Кількість антіборреліозних агентів IgG класу до патогенних мікробів, що викликають бореліоз:

• показник до 16 - інфекції немає;
• від 16 до 22 - є сумніви;
• 22 і вище - результат позитивний.

Anti-Borrelia IgM:

• нижче 0,8 - боррелий не виявлено;
• в рамках 0,8-1,1 - аналіз сумнівний;
• вище 1,1 - позитивний.

Варто відзначити, що якщо негативний серологічний аналіз отриманий на початку розвитку захворювання, то не означає, що в організмі немає бореліозу. Така особливість пов`язана з тим, що антитіла до борреліозним антигенів можуть визначатися тільки через 3-6 тижнів після появи типових симптомів. У цьому випадку необхідна перездача матеріалу.

При сумнівному результаті людині рекомендують здати повторний аналіз через 7 днів, так як він найчастіше виявляється на початковій стадії інфікування або на фоні прийому антибіотиків.

Контрольні аналізи рекомендується здавати в тих же умовах, що і перші, звертаючись до послуг тієї ж лабораторії, обов`язково в ранковий час і з дотриманням певних правил.

У деякої кількості пацієнтів (в середньому у 7-8%), що не мають в організмі Боррель, аналіз підвищений. Це буває в разі розвитку ендокардиту, мононуклеозу інфекційного походження або ж наявності спирохет іншого типу.

Імуноглобуліни М (IgM) можуть виявлятися через 14-28 днів з часу інфікування. Їх утворення відбувається перед появою імуноглобулінів, що відносяться до G класу. Але у деяких пацієнтів синтез IgM може відбуватися з запізненням або ж не відбуватися взагалі.

кров на кліщовий енцефаліт і бореліоз в цьому випадку здається не раніше трьох тижнів після укусу.

культуральний метод

Отримання результату грунтується на ізоляції хвороботворного мікроба, в цьому випадку - боррелии, з біоматеріалу на живильне середовище. Для аналізу підходить практично будь-яка рідина або тканину людського організму - кров, спинномозкова, внутрішньосуглобова, лімфатична рідина, тканини біопсії і ін.

Боррелії дуже вимогливі в питаннях культивування, тому вчені довгі роки створювали сприятливе середовище, котораяносіт назву Barbour-Stoenner-Kelly.

Основними умовами для успішного культивування є:

• отримання біоматеріалу на початку розвитку інфекції;
• стерильність під час забору;
• якнайшвидша транспортування в лабораторію і приміщення на живильне середовище.

Виявити бореліоз таким методом вдасться тільки в тому випадку, якщо хворий ще не почав курс антибіотикотерапії.

Найточніший результату аналізу виявляється з біоптатів, отриманих з області укусу - в 60% випадків вдається ізолювати мікроби. При хронічному атрофічному акродерматіте (ХААД) це відсоток вище і досягає 90%.

Подібний аналіз крові на бореліоз має найнижчий показник позитивного результату - від 1% до 3%, при заборі ліквору або внутрішньосуглобової рідини ця цифра варіюється від 15 до 25%.

Вважається, що культуральна методика, не дивлячись на всі свої переваги, не підходить для практичного використання. Дослідження може тривати від 3-х до 10 тижнів, коштує дорого, а по ефективності все ж таки поступається найбільш сучасних методів. Найчастіше її застосовують для наукових досліджень, для отримання борреліозной біомаси, котораянеобходіма для дослідницької діяльності.

Методика Вестерн-блот

На сьогоднішній день вважається найбільш точним діагностичним методом для виявлення борелій. Він грунтується на аналітичному підході до визначення в матеріалі специфічних білків.

Перш за все, застосовується електрофорез для структурного поділу білків. Потім їх переносять на спеціальну мембрану, а після застосовуються детектори з антитілами, специфічними до даному білку.

Вестерн-блот відрізняється від попереднього методу тим, що серологічне дослідження визначає загальна кількість антитіл, специфічного і неспецифічного характеру. Тестування може дати позитивний результат через те, що в аналізі присутні антитіла до неспецифічним антигенів.

Методика ж Вестерн-блоту Високоспецифічні. Виявляючи антитіла, вона визначає проти якого типу збудника вони виробляються. Це дозволяє виключити вплив на результат аналізу перехресних реакцій, пов`язаних з неспецифічними антигенами.

Якщо розглядати чутливість, білковий блот дещо програє аналізу ІФА, наприклад, коли в організмі пацієнта присутній вірус імунодефіциту, він може дати негативну відповідь.

Можливість отримання ложноположительного результату в иммуноферментном дослідженні при наявності ВІЛ вимагає комплексної діагностики, враховуючи ІФА, Вестерн-блот, клінічну картину і епідеміологічний стан.

Аналіз на імуноглобулін G.

В цьому випадку кров на бореліоз беруть, щоб визначити стадію розвитку інфекції, імуноглобулін відповідає за вторинний відповідь імунної системи. Існує 3 фази: гостре розвиток, хронічне і інфекційне. У нормі показники результату повинні бути наступними:

• у дорослих пацієнтів - від 7 до 16;
• підлітків від 11 до 16 років - від 6,98 до 15,6;
• дітей від 5 до 10 років - від 5,04 до 9,16;
• дітей від 2-х до 5 років - від 4,53 до 9,16.

Знижений кількість імуноглобуліну G може сигналізувати про наявність імунодефіциту.

Метод реакції непрямої флюорісценціі (РНІФ).

Цей спосіб дозволяє виявляти антитіла до можливих антигенів, шляхом фарбування біоматеріалу флюорохромом і вивчення його під мікроскопом з люмінесцентним освітленням.

Має деякі переваги перед методом РІФ, тому що може не тільки виявити антигени, але і визначити титри антитіл. Підвищена чутливість цього методу дозволяє, застосовуючи однакову сироватку, виявляти різні антигени вірусного і бактеріального походження.

На першому етапі дослідження антитіла взаємодіють з антигеном, на другому відбувається ферментативна індикація антигенів.

Пряма мікроскопія.

Для даного аналізу здається кров, ліквор, тканини, отримані шляхом біопсії, кліщовий гомогенізат. Результати мікроскопічного дослідження не зовсім достовірні, після фарбування мікроби втрачають структурність і складно визначити: патогенні вони чи ні. Для даного методу при низькому вмісті боррелий в крові нерідко біологічну рідину концентрують, пропускаючи її через центрифугу.

При даному способі виявлення барреліоза присутній ймовірність помилково негативні результати.

Коли і як проходять діагностику?

Всі перераховані вище діагностичні методи використовуються в різні періоди розвитку хвороби.

Аналіз ПЛР проводять через 1,5 тижні після можливого інфікування, імуноферментний дослідження і Ніф - через 30 днів.

З огляду на нюанси кожного способу, необхідно, щоб розшифровкою результатів займався інфекціоніст з досвідом, інакше високі ризики отримати недостовірну інформацію.